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高压纳米均质机的应用之高压细胞破碎机

2022-11-18   
今天我们来分享,高压纳米均质机的应用之高压细胞破碎机的相关内容,细菌的粉碎在生物领域的应用是细菌培养完成、离心后的一个重要工艺,这当中所涉及到的一些主要技术要点分别是:细菌破碎率,细菌的重悬,温度控制。

1细胞破碎率


为了尽量多的提取细菌里面的目的蛋白,用户们都希望高压细胞破碎机对于细菌的破碎率能达到一个非常好的效果。当然,如果能到100%当然就更好了!如何去测定经细胞破碎机破碎后样品的破碎率呢?一般来说有三种方法:


1)显微镜观察法:这种方法看似比较简单和粗糙,但确实是现实当中一个非常常用,用得十分多的一种方法。


2)电泳法:当然,这种检测方法是否准确有一个前提条件,即细菌的粉碎过程中目的蛋白的活性并没有因为温度或者其他因素而受到影响。


3)菌落培养法:当然,这三种方法都需要做几组对比实验,取平均值来计算其破碎率。根据实际情况选择哪种方法。


那么高压纳米均质机所能达到的细菌的破碎率到底有多高呢?一般来说,大肠杆菌的破碎率可以达到至少95%以上,酵母菌的破碎率可以达到90%以上。当然,不同品牌的设备所需要的工艺也是不一样的,大肠杆菌需要的粉碎压力一般在800ar~1500bar,粉碎次数一般为1~3次;酵母菌需要的粉碎压力一般在1200bar~2000bar,粉碎次数一般为3~5次。


2细菌重悬


细菌的重悬对于每一个做过细菌破碎的用户而言都是十分熟悉的一件事情,培养好的细菌经离心收集之后在粉碎之前必须将收集好的菌泥与缓冲液按照一定的配比进行重悬,重悬好之后才能进行粉碎。由于高压细胞破碎机对于待处理样品的均一性要求比较高,所以细菌在重悬过程中浓度可以高也可以低,但是菌体在缓冲液中必须悬浮得非常均匀。


3温度控制


细菌在破碎的时候主要是受到爆破力,撞击力和剪切力而起到破碎效果的,而这三个力中爆破力和撞击力是十分主要的。从能量学角度来看,细菌在经过高压细胞破碎机的狭缝之前受到了很高的压力的挤压,这个时候细菌所受到的能量全部是势能,而从狭缝喷射出来时转换成了一部分动能,另外很大一部分则转换成了热能。


十分后,根据原理来看,所有的高压纳米均质机用于高压细胞破碎都会产生热量,而且压力越高时产生的热量就越多,而由于生物蛋白都具有活性,所以所有的高压细胞破碎机要想在细菌粉碎行业得到广泛的使用,控温措施十分关键。

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